AbMole科研-TET1的下调通过减少AJAP1的DNA羟甲基化促进膀胱癌细胞增殖和侵袭

AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：TET1的下调通过减少AJAP1的DNA羟甲基化促进膀胱癌细胞增殖和侵袭。

十一易位 1 (TET1) 是甲基胞嘧啶双加氧酶的成员，可催化 5-甲基胞嘧啶 (5 mC) 转化为 5 羟甲基胞嘧啶 (5 hmC) 以促进去甲基化过程。据报道，失调的 TET1 蛋白和 5 hmC 水平以癌症类型依赖性方式抑制或促进致癌作用。目前，TET1在膀胱癌（UBC）发展中的作用及其潜在的分子机制仍不清楚。本研究中发现与正常尿路上皮相比，UBC 标本中 TET1 的表达下调，并且与肿瘤分期和分级以及总生存期呈负相关，表明其与 UBC 进展呈负相关。UBC 细胞中的 TET1 沉默增加了细胞增殖和侵袭性，而野生型 TET1-CD（但不是其酶失活突变体）的异位表达逆转了这些作用并抑制了体内的致瘤性。此外，作为 TET1 活性的直接调节剂，维生素 C 处理增加了 5 hmC 水平并抑制了 UBC 细胞的非贴壁依赖性生长和致瘤性。此外，研究发现 TET1 维持 AJAP1 基因启动子的低甲基化，该基因编码粘附连接相关蛋白 1。AJAP1 的下调逆转了 TET1-CD 诱导的 β-连环蛋白的核转位，从而抑制其表达下游基因。在人类 UBC 标本中，AJAP1 经常被下调并与 TET1 呈正相关。值得注意的是，TET1 和 AJAP1 的低表达水平预示着 UBC 患者的不良预后。总之，本研究发现频繁下调的 TET1 水平降低了 AJAP1 启动子的羟甲基化，随后激活了 β-连环蛋白信号以促进 UBC 的发育。 TET1 和 AJAP1 的下调可能是 UBC 患者有前途的预后生物标志物。

Protease inhibitors（Abmole，M5293）是一种广谱蛋白酶抑制剂，适用于哺乳动物细胞及组织的蛋白质提取及纯化，蛋白免疫印迹（Western Blot）,免疫共沉(Co-IP),免疫荧光（IF） ,免疫组织化学（IHC）,激酶测定（kinase assay）和抗体、酶诊断试剂盒（DigKit）等。在本研究中，用于进行免疫共沉淀试验。Phosphatase inhibitors（Abmole，M7528）适用于保护哺乳动物细胞及组织中蛋白和脂类磷酸化的稳定性。在本研究中用于进行免疫共沉淀试验。

FIGURE 6 | Ten-eleven translocation 1 (TET1) inhibited urinary bladder cancer (UBC) progression by regulating β-catenin through mediating adherens junction-associated protein 1 (AJAP1) expression.

当在TET1-CD过表达的UBC细胞中耗尽AJAP1时，与TET1-CD组相比，活性β-连环蛋白及其下游靶基因表达增加（图6E）。 此外，免疫共沉淀（co-IP）测定证实内源性 AJAP1 与 T24 细胞中的 β-连环蛋白相互作用（图 6F）。 由于 AJAP1 定位于细胞膜上，AJAP1 和 β-catenin 的相互作用可能将 β-catenin 隔离在细胞质中。

鸣谢：Yi-Lin Yan, et al. Front Oncol. 2020 May 21;10:667.