AbMole科研-甘参复方通过抑制炎症反应和细胞外信号调节激酶磷酸化在体内外改善肝纤维化

AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：甘参复方通过抑制炎症反应和细胞外信号调节激酶磷酸化在体内外改善肝纤维化。

肝纤维化是全球普遍存在的健康问题，目前仍缺乏有效的药物。中草药甘参复方 (GSFF) 由丹酚酸 B 和甘草酸二铵组成。在这项研究中，我们在体内和体外观察了GSFF对肝纤维化的影响，试图为治疗提供一些希望。本研究旨在观察GSFF在体内外对肝纤维化的影响，从炎症反应和细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化的角度探讨其作用机制。研究中，胆总管结扎大鼠用于体内实验。肝星状细胞-T6 (HSC-T6) 细胞用于体外实验。进行苏木精和伊红染色和Masson染色，生化测定，羟脯氨酸（Hyp）测定，酶联免疫吸附测定和蛋白质印迹以评估肝纤维化程度，肝功能，炎症反应和ERK磷酸化。应用 CCK8 测定、免疫荧光和蛋白质印迹来测试 GSFF 对 HSC-T6 细胞活化的影响，并确定 GSFF 是否对 HSC-T6 细胞中的 ERK 磷酸化有影响。

结果显示，GSFF 在治疗 3 周后改善了胆总管结扎大鼠的肝功能并抑制了肝纤维化，如组织学变化、羟脯氨酸测定和胶原蛋白 I 浓度所示。 GSFF 减轻炎症细胞浸润并减少促炎细胞因子 [肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 和白细胞介素-1β] 和 NF-κB 的合成。此外，GSFF 降低了 ERK 磷酸化。在体外，GSFF 在有和没有转化生长因子 β1 (TGF-β1) 刺激的情况下抑制 HSC-T6 细胞的活力并减少胶原蛋白 I 的合成。GSFF 在 0.5 μmol/L 的浓度下效果最大。 GSFF 抑制 HSC-T6 细胞中 α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA) 的表达，α-SMA 是 HSC 活化的标志物。与体内结果一致，GSFF 还抑制 ERK 的磷酸化并下调 NF-κB 的表达。结果表明，GSFF 在体内抑制肝纤维化进展，在体外抑制 HSC-T6 细胞活化。这些作用可能与减轻炎症反应和下调 ERK 磷酸化有关。

PD98059（Abmole，M1822，纯度99.83%）是一种 ERK1/2 信号的抑制剂。在本研究中，用于预处理HSC-T6细胞（50 μmol/L，24h）。

Figure 4 Gan Shen Fu Fang reduced extracellular signal-regulated kinase phosphorylation and NF-κB expression in common bile duct-ligated rats and HSC-T6 cells

结果表明，用 PDGF-BB 刺激细胞后，PD98059 和 GSFF 分别增加和抑制 ERK 磷酸化（图 4H）。 GSFF 还抑制 HSC-T6 细胞中 NF-κB (p65) 的表达（图 4E 和 G）。

鸣谢：Qing-Hong Du, et al. World J Gastroenterol. 2020 Jun 7;26(21):2810-2820.