AbMole科研-十二指肠贾第鞭毛虫通过体外激活TNFR1和K63去泛素化RIP1诱导肠上皮细胞凋亡的外在途径

AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：十二指肠贾第鞭毛虫通过体外激活 TNFR1 和 K63 去泛素化 RIP1 诱导肠上皮细胞凋亡的外在途径。

十二指肠贾第鞭毛虫是腹泻的主要病原体之一，每年在全球范围内影响数百万人的健康。很明显，十二指肠菌滋养体与肠上皮细胞 (IEC) 的附着可以诱导细胞死亡，而潜在的细胞和分子机制仍有待探索。本研究表明，用贾第鞭毛虫滋养体处理 Caco-2 细胞可导致细胞活力降低。 RNA 测序分析表明，许多凋亡相关基因和一些去泛素酶基因的表达在滋养体处理的细胞中表现出显着变化。滋养体激活了 IEC 表面上的死亡信号受体 TNFR1 和 Caco-2 细胞中的 caspase-3/8 (CASP3/8) 信号通路。滋养体刺激后RIP1的K63泛素化水平降低，同时去泛素酶CYLD和A20的表达增加。Caspase 抑制剂 Q-VD-OPH 可以挽救滋养体诱导的细胞凋亡。同样，TNFR1、CYLD 和 A20 沉默降低了滋养体处理的细胞中裂解的 CASP3/8 的水平，并逆转了滋养体的促凋亡诱导作用。这些数据表明，贾第鞭毛虫滋养体刺激可通过上调CYLD和A20表达引起的TNFR1和K63去泛素化RIP1激活CASP3/8信号通路，促进Caco-2细胞凋亡。本研究加深了对贾第鞭毛虫和 IEC 相互作用机制的理解。

Q-VD-OPh（Abmole，M2972，纯度>98%）是一种有效的pan-caspase抑制剂，在本研究中用于探索CASP3/8在贾第鞭毛虫诱导的Caco-2细胞凋亡中的作用（6h，50 μM/well）。

Fig. 6. Giardia trophozoites induced Caco-2 cell apoptosis via CASP3/8 signaling pathways.

在本研究中，用 Q-VD-O 处理 Caco-2 细胞可以显著抑制贾第鞭毛虫诱导的 CASP3/8 活化（图 6A）。贾第鞭毛虫诱导的 Caco-2 细胞凋亡依赖于 CASP3/8 的激活，因为 Caco-2 细胞与 Q-VD-O 的共孵育减弱了孵育 6 小时后滋养体诱导细胞凋亡的能力（图 6B）。此外，吖啶橙/溴化乙锭双染结果显示Q-VD-O可显着降低滋养体诱导的凋亡细胞（图6C）

鸣谢：Lin Liu, et al. Microb Pathog. 2020 Dec;149:104315.