AbMole科研- Hippo/YAP信号通过TAZ/IL-34轴调控肿瘤免疫微环境促进三阴性乳腺癌的进展

AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是: Hippo/YAP信号通过TAZ/IL-34轴调控肿瘤免疫微环境，以促进三阴性乳腺癌的进展。

越来越多的证据表明，癌细胞与其周围环境，即肿瘤微环境(TME)之间的双向作用有助于癌症的进展、转移和治疗耐药性。Hippo通路在肿瘤发生过程中控制多种中枢细胞功能，对该通路的深入研究主要集中在癌细胞上。然而，Hippo通路在三阴性乳腺癌中调节肿瘤-间质相互作用中的作用仍不清楚。因此，本研究的重点是揭示Hippo/YAP/TAZ信号通路对免疫微环境的影响。我们的研究结果显示，Hippo通路的活性与TNBC中更糟糕的疾病预后相关，可能通过TAZ/IL-34轴增加TAM浸润，导致免疫抑制微环境，并损害抗PD - L1的治疗效果。因此，TAZ/IL-34轴可能是TNBC患者的新靶点。

Pexidartinib (Abmole，M4867，纯度为100%)是一种口服有效的多靶点CSF-1R，Kit，和 Flt3受体酪氨酸激酶抑制剂，其IC50分别为20 nM, 10 nM 和 160 nM。

Fig. 4. The TAZ/IL-34 axis activated p38 and mTOR signaling and promoted macrophage proliferation and migration.

鉴于IL-34特异性结合其受体CSF-1R，并调节单核细胞和巨噬细胞的发育、分化和功能，我们接下来研究了IL-34在体外巨噬细胞增殖和趋化迁移中的作用。事实上，我们发现IL-34可以导致巨噬细胞的浓度依赖性增殖和趋化迁移(图4A和B)。磷酸化激酶阵列和WB显示IL-34增加了p38和mTOR的磷酸化水平，这可以被CSF-1R抑制剂Pexidartinib、p38抑制剂或mTOR抑制剂抑制(图4C和D, S6A和B)。增强的巨噬细胞增殖和迁移也可以被这些抑制剂消除，表明IL-34可以诱导巨噬细胞p38和mTOR信号通路的激活(图4E和F)。4T1或E0771细胞的CM增强了巨噬细胞的增殖和迁移能力，TAZ或IL-34沉默可以抑制这种能力，而IL-34过表达挽救了TAZ沉默诱导的4T1或E0771细胞对巨噬细胞增殖和迁移作用的抑制(图4G-I)。因此，YAP/TAZ信号通路可能通过上调IL-34介导的p38和mTOR信号通路的激活来促进巨噬细胞的增殖和迁移。

Fig. 7. CSF-1R blockade sensitized TNBC to anti-PD-L1-mediated immunotherapy by reversing the immunosuppressive tumor microenvironment.

关于TAMs抑制T细胞抗肿瘤免疫应答的能力，我们研究了通过TAMs的CSF-1R抑制剂靶向TAMs和通过抗PD - l1阻断剂抑制T细胞抗肿瘤应答是否可以协同抑制TNBC的肿瘤进展。原位4T1和E0771细胞小鼠或肺转移小鼠模型(4T1或E0771细胞注射到BALB/c或C57BL/6小鼠尾静脉中)分别用同型对照抗体、CSF-1R抑制剂Pexidartinib和抗PD- L1，或Pexidartinib和抗PD- L1联合治疗。结果显示，Pexidartinib联合抗PD- L1能显著减缓肿瘤生长(图7A-C)，抑制肺转移(图7D-E)，对小鼠体重无显著影响，对肝脏和肾脏无明显毒性(图7A-C)。因此，CSF-1R信号阻断和抗PD- L1阻断可能在TNBC中产生协同抗肿瘤反应。

为了进一步阐明Pexidartinib与抗PD- L1联合抗肿瘤协同作用的机制，我们通过免疫组化染色和流式细胞术分析了异质肿瘤中肿瘤浸润免疫细胞的数量。正如预期的那样，我们观察到Pexidartinib加抗PD- L1治疗组的TAMs明显减少，而联合治疗组的CD8+ T细胞数量增加(图7F-H)。免疫荧光染色进一步证实联合治疗组瘤内CD8+ T细胞数量增加(图7G)。此外，在Pexidartinib和抗PD- L1组中Ki-67和CD31的表达明显减轻，而在联合治疗组中caspase-3的表达上调。由此可见，Pexidartinib联合抗PD- L1治疗可以抑制癌细胞的增殖和血管生成，促进其凋亡，从而增强TNBC的抗肿瘤作用。

鸣谢：Zheng Wang, et al. Cancer Lett. 2022 Feb 28;527:174-190.