AbMole科研-雷帕霉素靶点抑制海参刺参自噬

AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：雷帕霉素靶点抑制海参刺参自噬。

mTOR通路介导的自噬是病原体感染哺乳动物中一种特别重要的免疫防御机制。然而，TOR 在棘皮动物自噬中的作用在很大程度上是未知的。在这里，从海参刺参（AjTOR）中克隆并鉴定了编码TOR蛋白的cDNA，并对其生物学功能进行了研究。 AjTOR基因编码一个2499个氨基酸的肽段，其代表结构域为DUF3385、FAT、FRB、PI3Kc和FATC，与脊椎动物直系同源物具有高度保守性。系统发育分析支持AjTOR属于TOR家族的一个新成员。此外，组织分布分析表明，AjTOR 在所有测试组织中普遍表达，在肌肉中转录最高。体内华丽弧菌感染和体外 LPS 攻击均可显著下调 AjTOR 的 mRNA 表达。更重要的是，透射电子显微镜观察表明，雷帕霉素处理导致体腔细胞在 3 和 6 小时内快速形成自噬体，然而，与对照相比，注射 MHY1485 的 mTOR 激活剂对自噬体形成有抑制作用，表明阻断了表达AjTOR 可以加速自噬信号。我们的研究结果支持 AjTOR 在海参刺参中充当负调节剂。

MHY1485（Abmole，M9050，纯度99.33%）是一种mTOR激活剂，通过抑制自噬体和溶酶体之间的融合，有效抑制自噬。在本研究中，用于对海参刺参的预处理（4 μg/kg，i.v.）。

Fig. 5. Autophagosome detection using transmission electron microscopy.

MHY1485是 mTOR 的激活剂，而雷帕霉素是 mTOR 的抑制剂，可诱导自噬。为了确定AjTOR是否直接介导海参中的自噬途径，研究分析了自噬水平与AjTOR功能的丧失和获得（图5）。 注射 MHY1485 后，发现与对照相比，AjTOR 的 mRNA 表达在 3 小时时显著增加了 1.68 倍（p < 0.01）（图 5F）。在相同条件下，TEM结果显示，与对照相比，自噬体在3小时和6小时均减少（图5A-C）。当注射 Rap 时，观察到在 3 小时和 6 小时时，带有颗粒材料的膜囊泡显著积累，在 6 小时时数量更大，表明注射 Rap 后自噬水平显著增加（图 5D，5E） . 此外，AjTOR 转录本在 Rap 挑战期间没有显著变化（图 5F）。

鸣谢：Shao Yina, et al. Fish Shellfish Immunol. 2020 Jul;102:480-488.